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何謂過(guò)柱子

 更新時(shí)間:2024-05-22 點(diǎn)擊量:189

我們常說(shuō)過(guò)柱子其實(shí)就是柱層析分離,也叫柱色譜,1903年由俄羅斯科學(xué)家第一次發(fā)明使用,其把植物色素的溶液經(jīng)過(guò)粉碎的碳酸鈣粉末,發(fā)現從上到下在碳酸鈣粉末上有不同的色帶,通過(guò)對不同色帶的分開(kāi)提取,得到了較純葉綠素,葉黃素等。

該方法經(jīng)過(guò)經(jīng)過(guò)百年的發(fā)展至今已經(jīng)比較成熟,固定相也從單一的碳酸鈣粉末發(fā)展到了氧化鋁(又分為酸性、中性、堿性),硅膠,活性炭等,其中各大實(shí)驗室常用的便是硅膠,一般分為正相硅膠和反相硅膠!

固定相(硅膠)一般要經(jīng)過(guò)純化和活性處理,顆粒大小應當均勻統一,理論上其顆粒越小、同單位質(zhì)量表面積越大,吸附能力就越高,分離效果也就越好。但是實(shí)際使用中固定相的顆粒太小時(shí)往往會(huì )存在兩個(gè)情況,一個(gè)是其質(zhì)更輕,容易飄散在空氣中(硅膠進(jìn)入人體無(wú)法降解,越細越毒);二是顆粒小也會(huì )導致顆粒之間縫隙小,從而使溶劑的流速就太慢,耗時(shí);以硅膠為例,目前已經(jīng)商業(yè)化用量最大的硅膠尺寸為200-300目。

過(guò)柱手段這塊,除了前面說(shuō)的正向循環(huán)制備,高效液相制備,過(guò)柱機這些自動(dòng)分析的設備,手動(dòng)過(guò)柱方面主要分為常壓過(guò)柱,減壓過(guò)柱,加壓過(guò)柱三種。

其中減壓過(guò)柱,因為洗脫劑流速過(guò)快,會(huì )損失大半部分塔板數,分離效果較差,適合分離TLC板子分的比較開(kāi)的樣品,尤其適合產(chǎn)物只有一個(gè)大極性雜質(zhì)的樣品;所有其大多數時(shí)間被用于化合物的預處理,過(guò)掉部分雜質(zhì)后再仔細純化。要注意的是,使用過(guò)程中因為負壓帶來(lái)的溶劑揮發(fā),會(huì )導致柱子外表面大量水珠凝結,對水敏感的化合物不要輕易嘗試。

常壓過(guò)柱是三者中分離效果更好的一種過(guò)柱方式,但是因為很多時(shí)候溶劑走的太慢,分離效果再好也會(huì )影響效率,所以這時(shí)候一般會(huì )給與壓力,這就是所謂加壓過(guò)柱;但這個(gè)壓力不宜過(guò)高,一般手動(dòng)的用雙鏈球,自動(dòng)的就用個(gè)養魚(yú)泵,兩者都可以改裝一下。

(內容來(lái)源:有機大菜仔)


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